茶樹為多年生異花授粉植物,具有高度異質性和雜合性。中國西南地區(qū)是茶樹的起源地,茶樹從起源地向中國其他地區(qū)和國外的自然傳播和人為傳播過程中,積累了自然演化和人工選擇的變異,從而在各茶區(qū)形成了豐富的茶樹品種資源。
然而在茶樹品種資源的大量引種及頻繁的品種資源交換過程中,造成同名異物、同物異名的現象,不僅給茶樹品種資源保護利用帶來諸多困難,也損害了消費者的權益。因而科學準確地區(qū)分和鑒定茶樹品種資源具有重要意義。
本研究通過收集國內外103份茶樹種質,利用SNP標記并結合茶樹品種資源基本信息構建茶樹品種資源分子身份證,以期為茶樹品種資源保護鑒定提供一種新思路。
1供試材料
供試茶樹品種資源來源于武夷學院茶樹種質資源圃(福建省武夷山市)和福建省農業(yè)科學院茶葉研究所茶樹種質資源圃(福建省福安市),其中,中國茶樹品種資源有101份,來自華南、西南、江南、江北四大茶產區(qū)的10個茶葉主產區(qū)省份;國外茶樹品種2份,包括日本的玉綠和格魯吉亞的格魯吉亞1號。
2結果
1、標記獲得與分析
從茶樹的表達序列標簽數據庫中挖掘出1786個候選SNP位點。根據序列保守性,篩選出96個SNP標記位點,與最新茶樹基因組比對發(fā)現候選位點較均勻地分布于茶樹全基因組的15條染色體上;對茶樹品種資源的候選SNP位點的多態(tài)性信息進行分析,剔除10個不具多態(tài)性的位點,剩余86個位點的信息指數平均值為0.517,觀測雜合度平均值為0.370,期望雜合度平均值為0.346,固定指數平均值為-0.036,次等位基因頻率平均值為0.269。從86個SNP位點中篩選出24個多態(tài)性高的SNP位點,組成DNA指紋圖譜,可區(qū)分出全部參試茶樹品種資源。
對24個SNP位點組成的DNA指紋圖譜并結合茶樹品種資源基本信息進行數字編碼,最終形成由28位數字組成的茶樹品種資源分子身份證。
2、茶樹品種資源信息編碼
茶樹的基本信息由4位數字組成,其中,茶樹品種資源類型分類參考陳亮等方法。第1位數字代表茶組植物具體物種,茶樹(Camelliasinensis(L.)O.Kuntze)為1,大廠茶(C.tachangensisF.C.Zhang)為2,厚軸茶(C.crassicolumnaChang)為3,大理茶(C.taliensis(W.W.Smith)Melchior)為4,禿房茶(C.gymnogynaChang)為5;第2-3位數字代表行政區(qū)劃代碼,如福建為35,浙江為33,云南為53,國外為00;第4位數字代表茶樹品種資源類型,野生茶樹為1,地方品種和地方種質為2,優(yōu)良品種(含育成品種)為3,新選品系、株系為4,國外品種為5。后24位數字由24個SNP分子標記的基因型轉化而來。
以福鼎大白茶舉例:
屬茶組植物中的茶樹(C.sinensis),原產于福建,品種資源類型為優(yōu)良品種,轉換成數字碼為1353;其24個SNP分子標記的基因型分別為TC、TT、AT、CT、GG、GG、CC、TC、TG、TC、TT、AG、GG、TT、CC、AG、CT、TT、CC、AT、GG、GG、CC、TC,轉換成24位數字碼為131132311121332112313231。則福鼎大白茶的分子身份證為1353131132311121332112313231。
3結論與意義
依據SNP標記的多態(tài)性信息,篩選SNP位點,精準區(qū)分全部供試茶樹品種,并將24個SNP位點所構建的茶樹品種資源DNA指紋圖譜及品種資源的基本屬性信息編碼成特定的數字串,使每份茶樹品種資源具有唯一的分子身份證,并生成相應的條形碼和二維碼,可快速被掃碼設備識別。
本研究結果對于茶樹品種資源區(qū)分和精準鑒定、分子數據數字化建立具有重要的意義和實際應用價值,為茶樹品種資源DNA分子身份證的構建提供了思路。
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